The Triatominae (Hemiptera:Reduviidae) contains the principal and potential Chagas disease vectors present in Mexico, Central America and South America. Triatoma flavida and T. bruneri are Cuban species. These species are closely related according to morphology and were considered synonyms until 1981, when they were separated on the grounds of external characters of the body and the morphology of male genitalia. The present study seeks to analyze genetic polymorphism of T. flavida and T. bruneri populations using RAPD techniques, and to assess the genetic relationship between these species. Ten random primers were used to evaluate the genetic variability among species using RAPD-PCR. The genetic flow among them was calculated. The dendrogram based on calculated Jaccard distances showed two clearly distinguishable clusters which coincided with the studied species. Within each species, moderate genetic differentiation (Fst 0.05-0.15) and migration rates (N > 1) were found among populations, that reveal gene flow and genetic homogeneity. Between species, the Fst value showed a high genetic differentiation and the migration rate was insufficient to maintain genetic homogeneity, and confirmed the absence of gene flow between them. Our results confirm the genetic variability among T. flavida and T. bruneri species.

La subfamilia Triatominae (Hemiptera: Reduviidae) agrupa a los vectores principales y potenciales de la Enfermedad de Chagas, presente en México, Centroamérica y Sudamérica, Triatoma flavida y T. bruneri son especies autóctonas cubanas. Estas especies están muy relacionadas desde el punto de vista morfológico y por ello fueron consideradas sinonimas hasta el 1981, cuando fueron separadas teniendo en cuenta los caracteres externos del cuerpo y la morfología de la genitalia del macho. El presente trabajo pretende confirmar el polimorfismo genético entre las poblaciones selváticas de T. flavida y domiciliadas de T. bruneri utilizando la técnica de RAPD-PCR. Un total de 10 cebadores al azar fueron usados para evaluar la variabilidad genética entre las especies usando la técnica de RAPD-PCR, calculándose el flujo genético entre las especies. El dendrograma obtenido, basado en la distancia genética de Jaccard, mostró dos grupos que coinciden con las especies estudiadas. Dentro de cada especie estudiada se encontró una moderada diferenciación genética (Fst 0.05-015) y tasas de migración (N > 1) que revelan flujo genético y homogeneidad genética. Entre las especies estudiadas los valores de Fst muestran una alta diferenciación genética y tasas de migración insuficientes para mantener homogeneidad genética y confirman la ausencia de flujo genético entre ellas. Estos resultados confirman la variabilidad genética entre ambas especies.

OBJECTIVE: To evaluate the residual effect of insecticide Ficam (bendiocarb) 80 WP for the control of Aedes aegypti in the perifocal application. METHODS: this product was applied in 95 blocks located in a health area located in Santa Clara, Villa Clara province. Of a total number of 5 188 dwellings, the insecticide was used in 5 070 of them at a dose of 3 g per litre. During this intervention that was carried out from January to July, 2007, 7 125 water tanks on the floor, 1 722 water tanks placed on the roofs and 9 802 other sites such as drainages, cisterns, outlets, etc were sprayed. Also the product was used where the tanks were placed and in surrounding areas. RESULTS: Two months after the intervention, no treated water tanks were found to be positive to Aedes aegypti larvae; just 2 were positive on the third month and on the fourth month (July), more positive signs of Aedes aegypti presence were detected in treated tanks. CONCLUSIONS: According to the results achieved with Ficam 80 WP, it proved to be effective for the control of Aedes aegypti mosquitoes up to three months after its application, but on the fourth month, greater positivity to Aedes aegypti larvae began to be detected in treated tanks and water containers.

OBJETIVO: evaluar el efecto residual del insecticida Ficam (bendiocarb) 80 WP para el control de Aedes aegypti en el tratamiento perifocal. MÉTODOS: se aplicó a 95 manzanas del área de salud XX Aniversario A, en Santa Clara. Villa Clara. De un total de 5 188 viviendas, 5 070 fueron tratadas con el insecticida a la dosis de 3 g/L de agua. En esta intervención que se efectuó de enero a julio de 2007, se rociaron 7 125 tanques bajos, 1 722 tanques elevados y 9 802 depósitos de otros tipos como tragantes, desagües, cisternas, vertederos, etc.; de igual manera se aplicó el tratamiento al lugar donde se encontraban colocados los tanques (trampa) y áreas periféricas. RESULTADOS: en los 2 meses posteriores al tratamiento, no se encontraron depósitos tratados positivos a larvas de Aedes aegypti y solo 2 en el tercer mes, en el cuarto mes (julio) se observó un aumento de la positividad en los depósitos tratados. CONCLUSIONES: de acuerdo con los resultados el Ficam 80 WP es efectivo en el control del mosquito Aedes aegypti, hasta 3 meses después de su aplicación, porque a partir del cuarto mes comienza a incrementarse la positividad en los depósitos tratados.

Random amplified polymorphic DNA (RAPD) technique is a simple and reliable method to detect DNA polymorphism. Several factors can affect the amplification profiles, thereby causing false bands and non-reproducibility of assay. In this study, we analyzed the effect of changing the concentration of primer, magnesium chloride, template DNA and Taq DNA polymerase with the objective of determining their optimum concentration for the standardization of RAPD technique for genetic studies of Cuban Triatominae. Reproducible amplification patterns were obtained using 5 pmoL of primer, 2.5 mM of MgCl2, 25 ng of template DNA and 2 U of Taq DNA polymerase in 25 µL of the reaction. A panel of five random primers was used to evaluate the genetic variability of T. flavida. Three of these (OPA-1, OPA-2 and OPA-4) generated reproducible and distinguishable fingerprinting patterns of Triatominae. Numerical analysis of 52 RAPD amplified bands generated for all five primers was carried out with unweighted pair group method analysis (UPGMA). Jaccard's Similarity Coefficient data were used to construct a dendrogram. Two groups could be distinguished by RAPD data and these groups coincided with geographic origin, i.e. the populations captured in areas from east and west of Guanahacabibes, Pinar del Río. T. flavida present low interpopulation variability that could result in greater susceptibility to pesticides in control programs. The RAPD protocol and the selected primers are useful for molecular characterization of Cuban Triatominae.

La técnica de ADN polimórfico amplificado al azar (RAPD) es un método simple para detectar el polimorfismo genético del ADN. Diferentes factores afectan los perfiles de amplificación lo que se manifiesta en la presencia de bandas falsas y en la reproducibilidad del ensayo. En nuestro trabajo analizamos los cambios de la concentración de cebador, ADN molde, cloruro de magnesio y de Taq ADN polimerasa con el objetivo de determinar su concentración optima, quedando optimizada la técnica del RAPD para su utilización en estudios genéticos de Triatomíneos cubanos. Empleando una concentración de cebador de 5 pmol, 2.5 mM de MgCl2, 25 ng de ADN molde y 2 U de Taq ADN polimerasa en 25 µL de reacción, se obtuvieron patrones de amplificación reproducibles. Un total de cinco cebadores al azar fueron usados para evaluar la variabilidad genética de T. flavida. Tres de ellos (OPA-1, OPA-2 y OPA-4) produjeron patrones distinguibles y reproducibles de triatomineos. El análisis numérico según la técnica de UPGMA usando el coeficiente de similitud de Jaccard a partir de las 52 bandas de amplificación de RAPD generadas por los cinco cebadores, fue usado en la construcción del dendograma. Se obtuvieron 2 grupos bien definidos según el análisis del RAPD, mostrando concordancia con el origen geográfico, las poblaciones capturadas en áreas del occidente y el oriente de Guanahacabibes, Pinar del Río, respectivamente. T. flavida presentó una baja variabilidad genética inter-poblacional y esto puede resultar en una mayor susceptibilidad al uso de insecticidas en los programas de control. La técnica de RAPD optimizada y los cebadores seleccionados son útiles para la caracterización molecular de Triatomíneos cubanos.

The applicability of 5 protocols useful for the extraction of genomic DNA of triatominae was evaluated and the modified potassium acetate method was described as a method with which a high yield and purity of DNA is obtained in the shortest time and at the lowest cost to be used as a mold in the random amplified polymorphic DNA technique (simple method to detect the DNA genetic polymorphism) and probably in other molecular techniqeus based in the PCR amplification. The DNA quality is a crucial element for this technique, which needs a DNA extraction method as standardized as possible to obtain a pure non degraded DNA free of RNA and of PCR inhibitors, because changes in the purity can affect the amplification profiles and this is manifested in the presence of false bands and in the little reproducibility of the assay.

Se evaluó la aplicabilidad de 5 protocolos útiles para la extracción del ADN genómico de Triatomíneos, y se describió el método del acetato de potasio modificado, como un método con el que se obtiene un alto rendimiento y pureza del ADN en el menor tiempo y costo, para su utilización como molde en la técnica de ADN polimórfico amplificado al azar (RAPD [la cual es un método simple para detectar el polimorfismo genético del ADN]) y probablemente en otras técnicas moleculares basadas en la amplificación por la reacción en cadena de la polimerasa. La calidad del ADN constituye un elemento crucial para esta técnica, la cual necesita un método de extracción de ADN lo más estandarizado posible con el que se obtenga un ADN puro, no degradado, libre de ARN y de inhibidores de la reacción en cadena de la polimerasa: porque cambios en la pureza afectan los perfiles de amplificación y esto se manifiesta en la presencia de bandas falsas y en la poca reproducibilidad del ensayo.

In order to determine the frequency of pediculosis in persons living with children diagnosed as positive to Pediculus capitis in educational institutions of the <FONT FACE=Symbol>?</FONT>Carmelo? People<FONT FACE=Symbol>?</FONT>s Council, the houses of 58 children who repeatedly had pediculosis from May to September, 1997 were visited. 14.54% of the 237 examined persons were positive (40 individuals). 82.5% were females. The mother was the most affected relative (32.5%). 30 positive children were matched by age, sex and grade with 30 negative children. People living together with the cases had a higher frequency of pediculosis (12.4%) than those living with the controls (1.8%) (t=3.49; p<0.001). The examination and treatment, if necessary, of those persons living together with the school children with pediculosis was recommended.

Con el propósito de conocer la presencia de pediculosis en conviventes de niños diagnosticados como positivos a Pediculus capitis en instituciones educacionales del Consejo Popular Carmelo, se visitaron las viviendas de 58 niños que presentaban pediculosis repetidamente durante los meses de mayo a septiembre de 1997. De 237 conviventes inspeccionados, 14,54 % resultaron positivos (40 personas), de los cuales 82,5 % pertenecía al sexo femenino. El familiar más afectado fue la madre (32,5 %). Se parearon 30 niños positivos, por edad, sexo y grado, con 30 niños negativos. Se comprobó mayor frecuencia de pediculosis en los conviventes de los casos (12,4 %) que en el de los controles (1,8 %) (t = 3,49; p < 0,001). Se recomendó la revisión y el tratamiento si procede, a los conviventes de escolares con pediculosis.

The life tables of 3 strains of Culex quinquefasciatus were studied under laboratory conditions: Slab, susceptible to reference; Old Havana, treated with cypermethrin until its fourth generation; and Cotorro, from the field. It was found that the different levels of resistance to organophosphate insecticides and pyrethroids present in the Cotorro and Old Havana strains did not influence either on the duration of the period of development of the inmature stages or in the sexual proportion of the emerged adults, but they had a favorable and directly porportional effect on the survival and longevity of the adults. However, they exerted a negative and inversely proportional influence on the reproduction and population growth of these strains. Useful data for the use and management of insecticides within the strategics of control of Culex quinquefasciatus, an important vector of lymphatic filariasis, are provided.

Se estudiaron las tablas de vida en condiciones de laboratorio de 3 cepas de Culex quinquefasciatus: Slab, susceptible de referencia; Habana Vieja, presionada con cipermetrina hasta su cuarta generación; y Cotorro, procedente del terreno. Se encontró que los diferentes niveles de resistencia a insecticidas organofosforados y piretroides presentes en las cepas Cotorro y Habana Vieja no influyeron en la duración del período de desarrollo de los estadios inmaduros ni en la proporción sexual de los adultos emergidos, y ejercieron un efecto favorable y directamente proporcional sobre la supervivencia y longevidad de los adultos. Sin embargo, influyó de manera negativa e inversamente proporcional sobre la reproducción y el crecimiento poblacional de estas cepas. Se proporcionan datos de utilidad para el uso y manejo de insecticidas dentro de las estrategias de control de Culex quinquefasciatus, importante vector de la filariasis linfática.

The utilization of a coagglutination technique for the identification of a human source for feeding mosquitoes is described. The dilution of ingested blood samples in filter paper was performed in 2 mL of a sodium chloride solution at 0.85 %. It was used a suspension of sensibilized Staphylococcus aureus with rabbit's serum, human plasmatic anti-proteins, and human anti-IgG rabbit's serum discriminated well between human and non human blood. No agglutination was observed with the negative control. This technique proved to be sensitive to identify 100 % of the human blood samples taken to the paper 24 hours after the mosquitoes completed their feeding at a temperature of 26 to 28 °C. Among mosquitoes fed and collected in the fields the test had a satisfactory result. Therefore, it may be used in routine work in the fields. The results showed the sensitivity and specificity of this method for identifying human blood ingested by mosquitoses.

Se describe la utilización de la técnica de coaglutinación para la identificación de una fuente humana de alimentación de mosquitos. La dilución de las muestras de sangre ingerida en papel de filtro se hizo en 2 mL de una solución de cloruro de sodio al 0,85 %. Se utilizó una suspensión de estafilococos sensibilizados con un suero normal de conejo como control negativo. La suspensión de Staphylococcus aureus sensibilizados con suero de conejo anti-proteínas plasmáticas humanas y suero de conejo anti-IgG humana discriminó bien entre sangre humana y no humana. No se observó aglutinación con el control negativo. Esta técnica resultó ser sensible para identificar el 100 % de las muestras de sangre humana llevadas al papel 24 h después de que los mosquitos completaron su alimentación a una temperatura de 26 a 28 °C. En mosquitos alimentados y colectados en el campo, la prueba se comportó de forma satisfactoria, en consecuencia puede ser utilizada en trabajos de rutina en el campo. Los resultados mostraron la sensibilidad y especificidad de este método para la identificación de sangre humana ingerida por mosquitos.